doc文档 氨基酸的薄层层析-实验报告

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摘要:..生物化学实验报告姓名:学号:专业年级:组别:第四实验室生物化学与分子生物学实验教学中心..下载可编辑.. ..氨基酸的薄层层析实验名称实验日期2015-11-09合作者实验地点第四实验室指导老师教师签批改日名期评分一、实验目的1.掌握薄层层析法的一般原理。2.掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术,包括制板、点样、层析、显色。3.掌握如何根据样品的移动速率(Rf值)来鉴定被分离的物质(本实验中即氨基酸混合液)。二、实验原理1.薄层层析法:本实验将硅胶作为固相支持物,羧甲基纤维素钠作为黏合剂,两者的混合物作为固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相展开溶剂在固定相上流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样、不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同,通过吸附解吸-再吸附-再解吸的反复进行,混合液中的氨基酸可以彼此分开。..下载可编辑.. ..2.硅胶吸附薄层层析的特点:层析用硅胶是一种多孔性物质,它的硅氧环交链结构表面上密布极性硅醇基(-Si-OH),这种极性的硅醇基能和许多化合物形成氢键而产生吸附。硅胶的吸附能力比氧化铝稍弱,其吸附活性也与含水量呈负性相关,故涂布操作前必须保证平板足够干燥。硅醇基显较弱的酸性,因而,硅胶只能用于中性、或酸性成分的分离,碱性成分不能用它分离,故混合氨基酸样品中的氨基酸组分均为中性或酸性氨基酸。硅胶的活化温度通常为105℃-110℃,不能过高,故活化过程中的烘干温度控制在70℃左右。3.氨基酸的显色反应:茚三酮水化后生成水化茚三酮,它与氨基酸的羧基反应生成还原茚三酮

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