胶原三股螺旋重复蛋白1基因真核表达载体的构建及其与microRNA-30b关系初探-周辉芳

专业资料 > 医药卫生 > 基础医学 > 文档预览

4 页 1639 浏览 14 收藏 4.9分

摘要:周辉芳，等．胶原三股螺旋重复蛋白１基因真核表达载体的构建及其与ｍｉｃｒｏＲＮＡ－３０ｂ关系初探３７７胶原三股螺旋重复蛋白１基因真核表达载体的构建及其与ｍｉｃｒｏＲＮＡ－３０ｂ关系初探周辉芳，，隗和儒，马士朝，张超群，王君平，杨新英，谢英，孙殿兴，１２１３２２２４１２１河北医科大学研究生学院，石家庄０５００１７；２中国人民解放军联勤保障部队第九八医院全军肝病中心，石家庄０５００８２；３承德医学院，河北承德０６７０００；４河北医科大学实验动物学部河北省实验动物重点实验室，石家庄０５００１７摘要：目的构建ｐＣＴＨＲＣ１－ＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ真核表达载体，初步探讨胶原三股螺旋重复蛋白１基因（ＣＴＨＲＣ１）与ｍｉｃｒｏＲＮＡ（简写为ｍｉＲ）－３０ｂ的关系。方法设计特异性引物，通过ＰＣＲ扩增合成含有ＣＴＨＲＣ１ＣＤＳ＋３′ＵＴＲ区的序列，并克隆至ｐＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ真核表达载体，得到ｐＣＴＨＲＣ１－ＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ真核表达载体。采用ＮｈｅⅠ／ＸｈｏⅠ双酶切电泳和测序法进行鉴定；通过脂质体转染法转染Ｈｕｈ７及ＨｅｐＧ２细胞评价转染效率；将ｍｉＲ－３０ｂｍｉｍｉｃ、ｃｏｎｔｒｏｌ、ｐＣＴＨＲＣ１－ＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ质粒和ｐＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ质粒转染至２９３Ｔ细胞中，分别采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和实时荧光定量ＰＣＲ法检测转染４８ｈ后ＣＴＨＲＣ１蛋白的表达水平及ｍｉＲ－３０ｂ的表达水平，初步探讨ＣＴＨＲＣ１基因与ｍｉＲ－３０ｂ的关系。两组间比较采用独立样本ｔ检验。采用ＮｈｅⅠ／ＸｈｏⅠ双酶切ｐＣＴＨＲＣ１－ＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ真核表达载体，得到５３００ｂｐ和１

温馨提示：当前文档最多只能预览 8 页，若文档总页数超出了 8 页，请下载原文档以浏览全部内容。

胶原三股螺旋重复蛋白1基因真核表达载体的构建及其与microRNA-30b关系初探-周辉芳第 1 页

胶原三股螺旋重复蛋白1基因真核表达载体的构建及其与microRNA-30b关系初探-周辉芳第 2 页

胶原三股螺旋重复蛋白1基因真核表达载体的构建及其与microRNA-30b关系初探-周辉芳第 3 页

下载文档到电脑，方便使用

下载文档

当前文档最多只能预览 8 页
还有 1 页可预览，继续阅读

本文档由匿名用户于 2020-02-21 08:22:17上传分享

下载原文档(2.14 MB)

你可能在找

胶原蛋白及胶原基因变异性疾病

胶原蛋白及胶原基因变异性疾病资料来源：琪乐美胶原蛋白胶原是多种结缔组织的主要成分，维持着组织和器官的完整结构，并与人体早期发育、器官形成、细胞间的连接、细胞趋化、血小板凝集以及膜的通透性等功能密切相关。胶原产生过多或过少、以及胶原结构的缺陷都可导致疾病。所有胶原分子都是由3条α链组成的三股螺旋结构，某些胶原的3条α链是相同的，某些胶原的3条α链则完全不同。目前已经鉴定出19个类型、30多种不同基因结构的α链，每条α链都是由重复的2Gly2X2Y2序列组成，其分子式是(Gly2X2Y)n。

4.6 分 9 页 | 27.00 KB | 2022-08-16 23:53
microRNA调控肿瘤相关蛋白研究：SIRT1蛋白-TP53蛋白&p53蛋白

microRNA调控肿瘤相关蛋白研究：SIRT1蛋白，TP53蛋白&p53蛋白MicroRNA(miRNA)是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小RNA，其在细胞内具有多种重要的调节作用。每个miRNA可以有多个靶基因，而几个miRNA也可以调节同一个基因。这种复杂的调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达，也可以通过几个miRNA的组合来精细调控某个基因的表达。 microRNA与Argonaute家族（AGO）的蛋白质结合，形成一个小的microRNA-AGO复合物，其功能是抑制蛋白质的产生。

4.6 分 2 页 | 162.69 KB | 2021-02-23 01:30
常见胶原贴敷料的问题解答

常见胶原贴敷料的问题解答1.市面上很多产品都说含有胶原蛋白，到底什么叫“胶原蛋白”？答：胶原，是人体内含量最多的蛋白质，它主要分布于人体皮肤、骨骼、牙齿、肌腱等部位，主要作用是做结缔组织的粘合物质。随着年龄的增长，人体胶原含量会逐渐流失（例如：人到25岁以后，胶原在体内的含量会以每年1.5%的速度逐渐减少，35岁减少15%，45岁减少30%），支撑体亦会渐渐变薄变硬、失去弹性，当真皮层的弹性与保水度降低到一定程度体外补充胶原能有效刺激人体自身胶原合成和补充体内已经减少的胶原。因此，对于女人来说，补充胶原就显得尤为重要。2.现在市面上有这么多种胶原蛋白产品，你们的跟别人有什么不同？

4.8 分 4 页 | 120.00 KB | 2022-08-16 23:37
蛋白质一级结构与高级结构关系

蛋白质一级结构与高级结构关系蛋白质分子是由氨基酸首尾相连而成的共价多肽链，天然蛋白质分子有自己特有的空间结构，称为蛋白质构象。蛋白质结构的不同组织层次：一级结构指多肽链的氨基酸序列。二级结构是指多肽链借助氢键排列成特有的α螺旋和β折叠片段。三级结构是指多肽链借助各种非共价键弯曲、折叠成具有特定走向的紧密球状构象。球状构象给出最低的表面积和体积之比，因而使蛋白质与周围环境的相互作用降到最小。四级结构是指寡居蛋白质中各亚基之间在空间上的相互关系和结合方式。二、三、四级结构为蛋白质的高级结构。

4.6 分 6 页 | 24.97 KB | 2022-07-05 23:52
怎么去除眼角鱼尾纹

眼角鱼尾纹形成原因：形成眼角鱼尾纹的主要原因是眼周缺水，皮肤新陈代谢功能下降，纤维组织老化、松弛，甚至断裂形成皱纹。此外，紫外线过度照射，运动过度、保养不当及一些疾病等内在因素也是形成眼角鱼尾纹的原因。怎么去除眼角鱼尾纹？去除眼角鱼尾纹需要内外兼顾：内部调理：芝元倍健牌胶原蛋白软胶囊富含NTH胶原锁子因子.具有锁止皮肤胶原蛋白流失的功能,从内里调息，而同时又能补充每日皮肤所需胶原蛋白,增加皮肤内胶原蛋白总量,美肤功效与普通胶原蛋白相比大大增强

4.7 分 2 页 | 15.00 KB | 2022-09-23 23:27
第一节氨基酸

2019生化笔记第一节氨基酸没有密码子：①鸟氨酸、瓜氨酸、同型半胱氨酸→不组成蛋白质②胱氨酸、羟脯氨酸、羟赖氨酸→组成人体蛋白质（蛋白质合成后加工修饰）R基是H1.没有旋光性，α螺旋不稳定，β转角常存在 2.肌酸：合成原料：甘氨酸、精氨酸、SAM（S-腺苷甲硫氨酸）⭐记○：赶紧SM3.磷酸肌酸：高能化合物骨骼肌中，为肌肉收缩提供能量↳还有无氧氧化4.卟啉：合成原料：甘氨酸、琥珀酰CoA⭐记○：不干活血红素的合成关键酶：ALA合酶辅助因子：磷酸吡哆醛部位：起始终末：线粒体；中间：胞浆⭐记○：始终在线5.嘌呤：甘氨酸参与嘌呤组成，不参与嘧啶组成6.一碳单位一个碳原子的有机基团生成一碳单位的氨基酸：丝、色、组、甘⭐记○：

3.0 分 5 页 | 384.79 KB | 2019-04-28 03:28
第四章第1节基因指导蛋白质的合成--练习题

第四章第1节基因指导蛋白质的合成练习题1.下列哪项是DNA和RNA共同具有的()A.双螺旋结构B.脱氧核糖C.尿嘧啶D.腺嘌呤2.有3个核酸分子，经分析有5种碱基，8种核苷酸，4条核苷酸A.20个B.15 个C.16个D.18个C．DNA特有的碱基是T，而RNA特有的碱基是U7.真核细胞中DNA复制、转录和翻译的主要场所依次是()D．DNA中的嘧啶和嘌呤相等，但RNA中不一定A.细胞核、细胞核、核糖体13 ．信使RNA中核苷酸的顺序是由下列哪项决定的()C.细胞核、细胞核、高尔基体B.细胞核、细胞质、核糖体D.细胞核、细胞质、内质网8.如图是有关真核细胞内遗传信息传递的过程，下列说法正确的是B．蛋白质分子中氨基酸的排列顺序

3.0 分 4 页 | 502.00 KB | 2019-05-19 05:50
Western-blot-实验原理和实验步骤

研究一些体外的蛋白质分子，寻找目的蛋白是否存在样品当中蛋白质的表达情况，上调或下调表达，在不同的样品中，样品之间的表达差异性。 Westernblot基本原理1蛋白免疫印迹的组成目录2Westernblot一般流程3Westernblot常见问题分析4WesternBlot基本原理1WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

4.8 分 25 页 | 2.97 MB | 2020-11-17 17:36
临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第二十六章-螺旋体及检验

第二十六章螺旋体及检验本章内容一、概述二、疏螺旋体属（一）伯氏疏螺旋体（二）回归热螺旋体（三）奋森螺旋体三、钩端螺旋体四、密螺旋体属梅毒螺旋体一、概述螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物基本结构与细菌相似：原浆柱=细菌菌体，由细胞壁，胞质膜及胞质内容物组成，胞质中含有核质（原始核）；中轴丝=螺旋体的运动器官；外膜=细菌荚膜相当。螺旋体革兰染色阴性，但着色较困难。螺旋体所致疾病主要有性传播疾病和自然疫源性疾病。螺旋体科有8个属，其中致病性螺旋体主要有3个属：疏螺旋体属，钩端螺旋体属，密螺旋体属。二、疏螺旋体属又称包柔螺旋体属。

3.0 分 7 页 | 427.00 KB | 2019-03-20 02:33
《基因指导蛋白质的合成》教学设计

第一节《基因指导蛋白质的合成》教学设计一、教材分析（一）教材的地位与作用所使用的教材是中图版必修二。讲述的内容是第三单元第二章第二节“基因的表达”。（二）教材前后联系“基因的表达”这部分内容，（1）从物质上看，讨论的是生命特有的两种大分子物质——蛋白质和核酸在生命现象中的关系。学习过程需要生物学第一模块《分子与细胞》的知识作为基础，其中密切相关的内容有第二单元“细胞的自我保障”中关于蛋白质的结构和合成，核酸的结构和功能等。

3.0 分 8 页 | 21.40 KB | 2020-01-31 06:01