细菌简单染色和革兰染色

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摘要:实验二细菌的简单染色和革兰染色一、实验目的1、学习无菌操作技术，掌握细菌涂片的制作方法。2、掌握细菌简单染色法和革兰染色法的原理及操作步骤，识别细菌的革兰染色结果。3、巩固显微镜油镜的使用方法。二、实验原理细菌生长于酸性、中性和碱性溶液时常带负电荷，所以通常采用带正电荷的碱性染料（如美蓝、甲紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。当细菌分解糖类产酸时，细菌所带正电荷增加易被带负电荷的酸性染料（如伊红、酸性复红或刚果红）着色。简单染色法就是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法。革兰氏染色法（GramStaining）由丹麦病理学家ChristianGram于1884年创立，是细菌学中很重要的鉴别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别分类为革兰氏阳性菌（G）和革兰氏阴性菌（G）这两种类型。革兰氏染色法之所以能够将细菌区分为革兰氏阳性菌（G）和革兰氏阴性菌（G）两大类，是因为这两类菌的细胞壁结构和成分不同。一般认为革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径大，不能阻止溶剂透入，因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色，再经蕃红复染就染成了红色；革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色。虽然如此，革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别，也有物理结构不同的结果，因为酵母菌细胞壁的成份完全和细菌不同，但具有革兰染色阳性反应。三、实验器材1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌、酵母菌、待鉴定的未知菌S1和S3。2、仪器及其他用品：显微镜、酒精

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