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临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第十章化学发光免疫分析技术
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摘要:第十章化学发光免疫分析技术第一节概述发光是指分子或原子中的电子吸收能量后,由基态(较低能级)跃迁到激发态(较高能级),然后再返回到基态,并释放光子的过程。根据形成激发态分子的能量来源不同可分为光照发光、生物发光、化学发光等。光照发光是指发光剂(荧光素)经短波长的入射光照射后,电子吸收能量跃迁到激发态,在其回复至基态时,发射出较长波长的可见光(荧光)。生物发光是指发生在生物体内的发光现象,如萤火虫的发光,反应底物为萤火虫荧光素。实际上,生物发光就是发生在生物体内的一种化学发光。一、化学发光化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。某些物质(发光剂)在化学反应时,吸收了反应过程中所产生的化学能,使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态,当电子从激发态回复到基态时,以发射光子的形式释放出能量,这一现象称为化学发光。化学发光与荧光的区别是形成激发态分子的激发能不同。荧光是吸收了光能使分子激发而发射的光;而化学发光是吸收了化学能使分子激发而发射的光。通常只有那些反应速度相当快的放能反应,才能在可见光范围内观察到化学发光现象,如氧化-还原反应。二是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子,必须能释放出光子。二、化学发光效率又称化学发光反应量子产率。化学发光效率决定于生成激发态产物分子的化学激发效率和激发态分子的发射效率。化学发光反应的发光效率、光辐射的能量大小以及光谱范围,完全由发光物质的性质所决定。第二节化学发光剂和标记技术一、化学发光剂化学发光剂必须具备下列条件:①发光的量子产率高;②它的物理、化学特性要与被标记或测定的物质相匹配;③能与抗原或
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