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ge离子交换层析柱protocol
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摘要:GE离子交换层析柱protocol5ml(举例子)Preparation1.Buffer:(pH根据蛋白的pI进行调整,pH尽量远离pI。pH>pI,过Q柱;pH>pI,过S柱)A:50mMTris-HClB:50mMTris-HCl1MNaCl过滤除杂质,4℃静置过夜除气泡。2.Protein:用滤器过滤除质;或者分装于EP管,14000rpm,4℃离心20min,去除沉淀。3.Prepareenoughtubes有流速时,禁止将泵的探头暴露到空气中!!!Procedure柱子在仪器上时,无论何时均要限压!!!1打开仪器总开关,电脑。检查:泵的探头是否放入纯水中。洗泵:Manual--pump--pumpbasicwash--Aon,Bon--insert--execute洗系统:Manual--pump--flow--10ml/min--insert--executeManual--other--Endtime--volume--40ml2安装柱子给流速:Manual--pump--flow--3ml/min--insert--execute(仪器显示系统压力为*Mpa)限压力:Manual--Alarms--Alarmspressure--+*)Mpa--insert--execute是HitrapQ柱子的最大限压)装柱子:先装上面,再下面,装完后用纸巾擦干,观察是否漏液。3清洗柱子限压力:Manual--Alarms--Alarmspressure--+*)Mpa--insert-execute给流速:Manual--pump--flow--1
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