新鲜实体组织单细胞悬液制备

专业资料 > 自然科学 > 生物学 > 文档预览

2 页 1253 浏览 9 收藏 4.7分

摘要:流式细胞术对细胞的各种参数分析必须基于单细胞的基础上，根据不同实体组织成分的特点可选择不同的分散细胞的方法，以期达到单细胞产量高、细胞损伤小的目的。在实体组织分散为单细胞的过程中，解离的方法有可能瞬间或持久地影响细胞的性质，比如，形态上显而易见的细胞膜破损，细胞表面上可出现泡状特征，还有一些是难以观察到的线粒体活性的变化、选择性膜表面抗原的丢失、蛋白质的丢失等，细胞受损程度受温度、pH值、处理时间等多种因素的影响。机械性或人工制备的单细胞，在某些性质上很可能已改变了原组织细胞特性，因此处理不同组织时，努力摸索方法，尽可能采用对细胞损伤小产率较高的单细胞悬液制备方法，最大限度地保持细胞原有特性。下面介绍几种细胞悬液制备方法，仅供参考。（一）酶消化法酶的作用原理主要有三方面：一是破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等，二是水解组织细胞的紧密连接结构的蛋白质，三是水解组织粘多糖物质。酶消化法是实体组织分散为单细胞的主要方法之一。常用的酶类有：胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、溶菌酶、弹性蛋白酶等。可根据分散的组织类型确定使用的酶类。需要注意的是使用条件和影响因素（酶浓度、酶效价、作用时间、pH值）等，如胃蛋白酶在碱性环境下失去活性，胰酶在中性溶液中活性欠佳。酶消化法常规程序如下：1、将适合于酶消化的组织置于离心管中。2、将选好的酶溶液1～2ml加入盛有被消化组织的试管中。3、常规消化20～30min（恒温37℃或室温），消化期间间断振荡或吹打。4、终止消化，收集细胞悬液，以300目尼龙网过滤，除去细胞，以低速离心除去细胞碎片。6、将制备好的单细

温馨提示：当前文档最多只能预览 8 页，若文档总页数超出了 8 页，请下载原文档以浏览全部内容。

本文档由匿名用户于 2020-01-22 06:46:01上传分享

下载原文档(9.64 KB)

你可能在找

浓缩血小板分离试剂盒

北京雷根生物技术有限公司www.leagene.com浓缩血小板分离试剂盒简介：血小板(Bloodplatelet)是哺乳动物血液中的有形成分之一，是从骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落下来的具有生物活性的小块胞质 Leagene洗涤血小板制备试剂盒又称浓缩血小板分离试剂盒，亦可简称为血小板制备试剂盒，可将血小板与其他血细胞成分分开，而且与血浆蛋白分开，该试剂未经过滤除菌，100ml规格该试剂盒可分离900ml新鲜血液该洗涤血小板制备试剂盒仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

4.6 分 2 页 | 33.25 KB | 2021-06-28 06:22
RAJI;黑人Burkitt淋巴瘤细胞悬浮培养

北京索莱宝科技有限公司RAJI；黑人Burkitt淋巴瘤细胞悬浮培养细胞名称：RAJI；黑人Burkitt淋巴瘤细胞生长特性：悬浮生长培养条件：RPMI1640(w/oHepes)10%FBS冻存条件： 2.7如细胞数量足够（一般情况下都提供足量细胞，约10），在超净台内将灌满的细胞/培养液悬液混匀分装，T75瓶20mL，T25瓶7-8mL，然后放入37℃、5%的CO2的温箱中培养。 3.如果细胞生长速度缓慢且细胞数量少，在超净台内将细胞/培养液悬液移入离心管，800转/分离心5分钟。上清（培养液）移入无菌瓶中，留待日后培养用。

4.8 分 2 页 | 86.31 KB | 2021-11-01 01:02
纯化水EP7.0、8.0

纯化水微生物指导：在纯化水的制备和随后的贮存中应采用适当的方法来控制和指导微生物数。应设置适当的警线来检测有害趋势。选择适当的样品体积来测得所希望的结果。 R2A琼脂培养基的促生长——测试菌的制备：用标准的稳定的测试菌的悬浮液或按表0008-1所示制备。运用批种子培养保持技术（批种子系统）来达到用于接种的微生物从原始种子开始不超过5代的培养。

4.7 分 3 页 | 32.00 KB | 2022-09-15 23:53
流式细胞仪分析技术及应用

八毛八文库(www.8doc8.com)--两亿文档等你下载,什么都有,不信你来搜第十七章c流式细胞术（flowcytometry，FCM）是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术流式细胞仪的发展综合了激光技术、计算机技术、显微荧光光度测定技术、流体喷射技术、分子生物学和免疫学等多门学科的知识。第一节概述流式细胞仪由液流系统、光学与信号转换测试系统和信号处理及放大的计算机系统三大基本结构组成，可对细胞悬液中的单个细胞或特定细胞或其超微结构进行多参数快速分析，带分选系统的流式细胞仪还可按实验设计要求分选出具相同特征的同类型细胞

3.0 分 4 页 | 81.50 KB | 2019-02-20 08:24
肉类怎么保鲜？正确措施有这些!

绝大部分人都有吃肉的习惯，而在平时生活中，人们可以吃到的肉类有很多，最常见的包括猪肉、鸡肉、牛肉等等，如果一次性购买很多新鲜的肉回来的话，那么保鲜工作就很讲究了，如果不会正确保存的话，肉类变质是非常快的鲜？(1)如果计划将买来的肉在几天内食用完的，则可放入冰箱的冷藏室内温度较低的部位；准备长期贮藏的，则应放入冰箱的冷冻室内。在速冻过程中，肉类食品内结成的冰晶很小，其组织细胞内液与细胞外液及细胞间的结晶体，不会流出来；有些冰箱用户，冷冻的方法不对头，使肉类食品结成大的冰晶，破坏食本文整理于网络，仅供阅读参考品的细胞膜，造成细胞破裂

5.0 分 3 页 | 16.57 KB | 2020-11-17 08:51
BS固定液

北京索莱宝科技有限公司BS固定液货号：G2300规格：500ml保存：室温，6个月产品介绍：固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林 BS固定液(BSfixingsolution)主要由甲醇、乙酸等混合而成，适用于细胞核染色的固定，尤其适用于细胞核DNA染色的固定。操作步骤(仅供参考)：1、按实验具体要求操作。 2、血涂片或细胞涂片置于提前预热至30～40℃的BSfixingsolution固定。3、进行下游染色实验。注意事项：1、组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

4.9 分 1 页 | 69.56 KB | 2021-03-31 18:05
补体溶血反应

补体的溶血反应原理：当红细胞与相应抗体相结合，在电解质存在时，可使红细胞产生凝集现象；若同时加入新鲜动物血清，则血清中的补体可与红细胞及其抗体（溶血素）形成的免疫复合物结合，从而激活补体导致红细胞溶解， 2、抗体：溶血素（SRBC抗体）。3、补体，新鲜豚鼠血清。4、生理盐水。5、小试管、刻度吸管、试管架、37℃水溶箱等。，液体红色透明管为溶血。

4.8 分 2 页 | 22.00 KB | 2020-11-07 05:26
江苏省连云港市2013年中考生物试卷

江苏省连云港市2013年中考生物试卷一、选择题：请在下列每题的四个选项中选出最符合题意的一项（每小题1分，共15分）．1．（1分）（2013•连云港）多细胞生物体有着井然有序的结构层次．家鸽与油菜相比特有的结构层次是（）A细胞．B．组织C．器官D．系统考点：动物体人体的结构层次；绿色开花植物体的结构层次．分析：此题考查的知识点是动物特有的结构层次．解答时可以从动物和植物的结构层次方面来切入．解答：解：动物的结构层次是细胞 →组织→器官→系统→动物体；植物的结构层次是细胞→组织→器官→植物体．因此家鸽和油菜相比，家鸽所特有的结构层次是系统．故选D．点评：解答此类题目的关键是熟记动、植物体的结构层次的不同点．2．（1分）（2013

3.0 分 12 页 | 512.00 KB | 2019-04-27 03:02
2020-2021学年黑龙江省龙东南六校高二上学期期末联考生物

2020-2021年度第一学期龙东南联合体期末联考高二学年生物试题考试时间：90分钟满分：100分一、单选题（每题1.5分，共60分）1．人体心肌细胞吸收到氧气的直接液体是()A．血浆B．细胞外液C．淋巴 D．组织液2.医生给病人注射药物,不同注射方式,药物到达靶细胞的途径不同。以下正确的(A.肌肉注射:淋巴液→血液→组织液→靶细胞B.肌肉注射:组织液→血液→组织液→靶细胞C.静脉注射:组织液→淋巴液→血液→靶细胞D.静脉注射:淋巴液→血液→组织液→靶细胞3.长期营养不良会引起组织水肿

4.8 分 12 页 | 2.46 MB | 2021-04-03 14:13
2020-2021学年黑龙江省龙东南六校高二上学期期末联考生物

2020-2021年度第一学期龙东南联合体期末联考高二学年生物试题考试时间：90分钟满分：100分一、单选题（每题1.5分，共60分）1．人体心肌细胞吸收到氧气的直接液体是()A．血浆B．细胞外液C．淋巴 D．组织液2.医生给病人注射药物,不同注射方式,药物到达靶细胞的途径不同。以下正确的(A.肌肉注射:淋巴液→血液→组织液→靶细胞B.肌肉注射:组织液→血液→组织液→靶细胞C.静脉注射:组织液→淋巴液→血液→靶细胞D.静脉注射:淋巴液→血液→组织液→靶细胞3.长期营养不良会引起组织水肿

4.7 分 12 页 | 2.46 MB | 2021-04-09 19:10