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ABTS测抗氧化性原理-具体操作-以椴树苷为例-李熙灿-曾婧媛
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摘要:ABTS测抗氧化性原理及其具体操作(以椴树苷为例)李熙灿曾婧媛【原理】ABTS法是一种被广泛用于检测物质体外抗氧化能力的方法。ABTS与K2S2O8反应可以生成稳定的自由基ABTS+,此自由基在734nm下有最大吸收且会显蓝绿色,当自由基被清除,数量减少其溶液颜色会变浅,从而导致734nm下吸光度降低。由此可以来判断样品清除ABTS+的能力。图1.ABTS自由基结构式图2.ABTS分子模型(不同角度)(采用Chem3DPro14.0软件绘制)【仪器与试剂】1.仪器可见分光光度计;SB3200D超声波清洗机;电子天平(BS110S);BIOHIT单道手动可调移液器(10-100μL、100-1000μL、1000-5000μL);微量比色皿;pH计。2.试剂椴树苷(AR)、BHA和Trolox(AR);甲醇(AR);无水乙醇(AR);ABTS(AR);K2S2O8(AR)【试验操作】图3.椴树苷结构式图4.椴树苷分子模型(不同角度)(采用Chem3DPro14.0软件绘制)清除ABTS+·自由基检测实验采用文献[1]的方法,并根据实际情况改动。操作如下:1配制溶液[1]取7.4mmol/LABTS储备液和2.6mmol/LK2S2O8储备液各1mL等体积混合,于室温、避光条件下放置12小时,即得ABTS+·自由基储备液。先用无水乙醇稀释ABTS+·工作液,使其在734nm波长下的A(吸光度)至0.701(A=0.7±0.02,温度30℃)。2实验操作及测定[1]用移液器精确移取ABTS+·工作液800μL、加椴树苷(1mg/mL,无水乙醇溶解)xμL
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