Rh血型定型操作规程

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摘要:Rh血型定型操作规程1.原理1.1单克隆混合试剂测定法：根据凝集反应原理，当被检测行红细胞上有D抗原存在时，可与抗D混合型血型定型试剂产生特异性的抗原反应，出现红细胞凝集现象。1.2酶介质测定法：当IgG类小分子特异性血型抗体与具有相应抗原的红细胞相遇时，虽能与红细胞上的特异性抗原结合，却因IgG分子间两个抗原决定簇的跨度小于红细胞间斥力而产生的距离（250nm），不能将相邻的红细胞彼此连接起来。酶介质可破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，减少细胞间斥力，使红细胞间的距离缩小，有利于IgG类抗体在两个抗原位点间的连接，使抗原抗体间的反应成为肉眼可见的凝集。2.操作步骤2.1玻片法（IgM+IgG型）2.1.1在玻片方格中加1滴抗D（IgM+IgG）混合试剂。2.1.2再加2滴2%~5%红细胞生理盐水悬液于抗D混合试剂中。2.1.3用干净的玻棒完全搅拌上述红细胞与抗D混合液。2.1.4前后左右倾斜玻片且同时观察凝集现象。2.1.5如出现凝集，则判断为Rh（D）阳性，反之为Rh（D）阴性。2.2试管法（IgM+IgG型）2.2.1在试管中加1滴抗D混合试剂。2.2.2再加1滴2%~5%红细胞生理盐水悬液于上述试管中，混匀。2.2.3以3200~3400r/min离心15~30秒。2.2.4轻轻振摇试管使红细胞重悬，肉眼或显微镜观察有无凝集现象。2.2.5记录结果，凝集者为阳性反应，反之为阴性反应。2.3微柱凝胶法：按ABO血型鉴定中微柱凝胶法进行检测，结果判断见ABO血型鉴定操作规程图3-1。3.注意事项3.1Rh血型系统的抗体多由免疫产生，血清中

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