TA-clone

教育专区 > 高中教育 > 高考 > 文档预览

7 页 556 浏览 14 收藏 4.7分

摘要:PCR产物的T载体克隆（一）重组T质粒的构建一．原理外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能，而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性，即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接率低，一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。T4噬菌体DNA连接酶催化DNA连接反应分为3步：首先，T4DNA连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物；然后，酶-ATP复合物再结合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上，使DNA腺苷化；最后产生一个新的磷酸二酯键，把切口封起来。连接反应通常将两个不同大小的片断相连。因为DNA片断有两个端点，所以切割时出现两种可能，一种是单酶切，另一种是双酶切，这两种酶切方法在基因工程操作中都经常用到。对于单酶切来说，载体与供体的末端都相同，连接可以在任何末端之间进行，这样就导致了大量的自连接产物。为了减少自环的高本底，可对载体进行5’除磷酸处理，原理是连接酶只能连接DNA片断的3’OH末端与5’端，所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时，由外源片断提供5’端就能与载体进行连接。通过这种方法可大大减少由载体的自环造成的高本底。对于双酶切来说，无

温馨提示：当前文档最多只能预览 5 页，若文档总页数超出了 5 页，请下载原文档以浏览全部内容。

下载文档到电脑，方便使用

下载文档

当前文档最多只能预览 5 页
还有 2 页可预览，继续阅读

本文档由匿名用户于 2022-07-06 23:08:05上传分享

下载原文档(29.00 KB)

你可能在找

Topo+TA+clone

TopoTA克隆方法（TopoTACloningKit）TopoTA克隆原理与TA克隆一样，唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶把PCR片断连接到T载体上，而TopoTACloning用的是DNATopoisomerase

4.9 分 2 页 | 61.15 KB | 2022-07-06 23:10
TD-LTE网络TA和TA-list规划

TD-LTE网络TA和TAlist规划及优化指导原则一、TA及TAlist规划原则1、TA及TAlist概念跟踪区（TrackingArea）是LTE系统为UE的位置管理设立的概念。 TA功能与3G系统的位置区(LA)和路由区(RA)类似。通过TA信息核心网络能够获知处于空闲态的UE的位置，并且在有数据业务需求时，对UE进行寻呼。一个TA可包含一个或多个小区，而一个小区只能归属于一个TA。TA用TA码(TAC)标识，TAC在小区的系统消息(SIB1)中广播。

4.9 分 15 页 | 2.13 MB | 2022-07-06 23:10
TA沟通分析

TA沟通分析T：Transactional交流／沟通A：Analysis分析TA沟通分析又称交互分析理论，是艾瑞克。伯恩（EricBerne）创立的。 TA沟通分析（transactionalanalysis，以下简称TA），国际沟通分析协会所下的定义是：“TA是一种人格理论，也是一种系统的心理治疗方法，以达到使人成长和改变的目的”。就人格理论来说，TA很清楚地描绘出人的心理结构，它以自我状态模式来描述人格的三个部分，这个模式还帮助我们了解不同的人格会怎样影响人的行为。TA的沟通理论，还可以延伸应用到分析组织和机构。

4.7 分 3 页 | 16.00 KB | 2022-07-06 23:09
UVP-15088LT3WA

AlInGaPGreenLEDdie.Thisdisplayhasagrayfaceandwhitediffuseddots.FEATURESCompactpackageContinuousuniformdotmatrixExcellentcharactersappearanceLowpowerrequirementsDEVICESDESCRIPTIONPACKAGEDIMENSIONINTERNALCIRCUITDIAGRAMMultiplexColumnCathodeFig.1Fig.2ABSOLUTEMAXIMUMRATINGS@TA

5.0 分 5 页 | 814.96 KB | 2021-09-14 01:10
超级爆米花机及萌小小家族展

守护吉祥物一只生性乐观爱笑的萌小鸡拥有逗萌的基因传闻如若能得到他的守护陪伴除了让你获得更多快乐外运气也会变得更好贱萌是ta性格的最大特点对于ta而言贱是人生百态萌是生活方式萌小贝始终用逗乐轻松贱萌搞笑的方式感染着被守护的每位幸运者 ta就是萌小贝原来他是这样

4.7 分 11 页 | 2.18 MB | 2021-11-22 01:55
超级爆米花机出租

守护吉祥物一只生性乐观爱笑的萌小鸡拥有逗萌的基因传闻如若能得到他的守护陪伴除了让你获得更多快乐外运气也会变得更好贱萌是ta性格的最大特点对于ta而言贱是人生百态萌是生活方式萌小贝始终用逗乐轻松贱萌搞笑的方式感染着被守护的每位幸运者 ta就是萌小贝原来他是这样

4.6 分 12 页 | 2.18 MB | 2021-11-22 01:54
4-000词的音节划分

fa-thercheekwaistcapmo-therfootbut-tocksbadgeba-byel-bowtoeshortsbro-therhaireyewa-tchsis-ternecklipstrou-sersgrand-fa-therheelbeardjeansgrand-mo-therkneenailbootscou-sinslegteethbeltun-cleheadpalmshirtauntnosehandbowtiean-kleshoul-dersfin-gerT-shirtarmsto-machswea-tersuitearchinsnea-kersshoeschesthipssockshel-metmouthwristcoatglo-vesfacetonguehatja-cketfore-headthumbhand-ker-chiefslip-perssunvi-sorrain-coatBath-roomcotspec-ta-clesrib-bonmi-rrorrat-tleswim-minga-pronrugLi-vingRoomneck-laceBed-r

4.8 分 82 页 | 265.00 KB | 2020-11-10 10:17
挽回爱情：挽回时要怎样进行对话

被分手的你伤心难过，需要发泄，你向所有人抱怨你的生活一团糟，恋情不顺利，抱怨你挽回对象的不理解，这时的你已经被负面情绪占满了，在这个时候你很容易把这种怨气显现在与你挽回对象对话中，你会抱怨TA“为什么跟你分手 ”“为什么不接你电话，不回你短信”这种怨气的话语不仅不会让TA对你有所怜惜，还会让TA厌恶，这样很容易让对方彻底切断与你的联系，这样只会给你的挽回增加一定的阻力。二．无条件认同对方所说，所做对方已经决定要跟你分手了，所以TA说话就不会就顾忌你了，TA会直接说出很多否定你的话语，而你这时万万不能被对方

4.7 分 2 页 | 17.54 KB | 2022-03-12 23:42
超级爆米花机展览租赁

守护吉祥物一只生性乐观爱笑的萌小鸡拥有逗萌的基因传闻如若能得到他的守护陪伴除了让你获得更多快乐外运气也会变得更好贱萌是ta性格的最大特点对于ta而言贱是人生百态萌是生活方式萌小贝始终用逗乐轻松贱萌搞笑的方式感染着被守护的每位幸运者 ta就是萌小贝

4.6 分 12 页 | 2.18 MB | 2021-11-22 01:56
TA与会计清算接口

表示有份额类别字段62003-07-18由于基金公司与托管行之间多对多关系开始增多，需要在文件名中予以区别，增加约定：在所有给托管行文件，文件名后再增加_AAA_BB其中AAA表示托管行代码，BB表示TA

4.7 分 7 页 | 229.00 KB | 2022-07-06 23:09